分离纯化蛋白质方法有哪些

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日常的生活当中，身体的一些结构成分以及分子量成分，是我们不太了解的，因为不了解所以才会让人不认识，产生一些分歧，给人们的身体也会造成影响，其实分离纯化蛋白质的方法，可以通过了解分离方法以及具体的组合成分进行相应的判断，只有了解到这方面的问题，才能知道究竟是如何组成的。

分离方法

透析(dialysis)利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法。

超滤法

应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜，达到浓缩蛋白质溶液的目的。

丙酮、乙醇等有机溶剂沉淀法，可破坏蛋白质的水化层，在0~4℃低温下，使蛋白质沉淀。环境温度高等不良因素影响下，有机溶剂可促使蛋白质变性。

盐析(salt precipitation)是将硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液，使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏，导致蛋白质沉淀。

免疫沉淀法:利用特异抗体识别相应的抗原蛋白，并形成抗原抗体复合物的性质，可从蛋白质混合溶液中分离获得抗原蛋白。

电泳法:蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒，在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术, 称为电泳(elctrophoresis) 。几种重要的蛋白质电泳:

电泳操作

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于蛋白质分子量的测定。

等电聚焦电泳，通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。

双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。

层析(chromatography)或色谱法:待分离蛋白质溶液(流动相)经过一个固态物质(固定相)时，根据待分离蛋白质的颗粒大小、电荷多少及亲和力等，使蛋白质组分在两相中反复分配，并以不同速度流经固定相而分离蛋白质。凝胶过滤(分子筛，gel filtration;排阻色谱):利用各蛋白质分子大小不同分离。

离子交换:蛋白质的电荷量及性质不同。

阳离子交换剂:CM-纤维素

阴离子交换剂:DEAE-纤维素

亲和层析:抗原-抗体，配体-受体，金属离子，生物素等

高效液相(HPLC):反相HPLC，离子HPLC，凝胶过滤HPLC

超速离心法(ultracentrifugation):根据蛋白质的分子量与形状分离。

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